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C-33 A細(xì)胞人宮頸癌細(xì)胞 細(xì)胞培養(yǎng)
貨號(hào)：BY-0620
品牌：乾思細(xì)胞
規(guī)格：T25瓶
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C-33 A 細(xì)胞人宮頸癌細(xì)胞培養(yǎng)
C - 33 A 細(xì)胞源自人宮頸鱗狀細(xì)胞癌，是研究宮頸癌發(fā)**展機(jī)制、評(píng)估**藥物效果的重要細(xì)胞模型。由于其對(duì)培養(yǎng)條件較為敏感，規(guī)范的培養(yǎng)操作是維持細(xì)胞活性和生物學(xué)特性的關(guān)鍵。
C - 33 A 細(xì)胞呈貼壁生長(zhǎng)，形態(tài)多為不規(guī)則多邊形，生長(zhǎng)較為迅速，具有典型的癌細(xì)胞增殖特性。在培養(yǎng)時(shí)，優(yōu)選含 10% 胎牛血清（FBS）的 DMEM 培養(yǎng)基。胎牛血清中富含細(xì)胞生長(zhǎng)所需的多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、生長(zhǎng)因子和激素，能夠支持細(xì)胞的代謝與增殖。同時(shí)，需向培養(yǎng)基中添加 1% 的青霉素 - 鏈霉素混合液，以預(yù)防細(xì)菌污染，保障細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境的無菌狀態(tài)。
細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境要求嚴(yán)苛，需將 C - 33 A 細(xì)胞置于 37℃、5% 二氧化碳的恒溫培養(yǎng)箱中。37℃接近人體生理溫度，為細(xì)胞內(nèi)各種酶促反應(yīng)提供適宜的溫度條件；5% 的二氧化碳濃度則用于維持培養(yǎng)基的 pH 值穩(wěn)定，防止培養(yǎng)基過堿影響細(xì)胞生長(zhǎng)。在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，需定期觀察細(xì)胞狀態(tài)，一般每 1 - 2 天在倒置顯微鏡下查看細(xì)胞生長(zhǎng)密度與形態(tài)。當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá)到 80% - 90% 時(shí)，便需及時(shí)進(jìn)行傳代。
傳代操作是 C - 33 A 細(xì)胞培養(yǎng)的重要環(huán)節(jié)。先用預(yù)熱的磷酸鹽緩沖液（PBS）輕柔沖洗細(xì)胞，去除殘留的培養(yǎng)基和代謝廢物；隨后加入適量 0.25% 胰蛋白酶 - EDTA 溶液進(jìn)行消化，將細(xì)胞從培養(yǎng)瓶壁分離下來。消化時(shí)需在顯微鏡下密切觀察，待細(xì)胞變圓、間隙增大，立即加入含血清的培養(yǎng)基終止消化。通過輕柔吹打使細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液，按 1:3 - 1:5 的比例接種至新的培養(yǎng)瓶中，并補(bǔ)充新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。此外，為保證細(xì)胞質(zhì)量，需定期對(duì) C - 33 A 細(xì)胞進(jìn)行支原體檢測(cè)，避免支原體污染影響細(xì)胞特性；同時(shí)，及時(shí)凍存低代數(shù)細(xì)胞，防止細(xì)胞老化或發(fā)生性狀改變 。

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