人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤抑制蛋白(pRB)試劑盒開(kāi)學(xué)季活動(dòng)

酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）已經(jīng)成為實(shí)驗(yàn)室常用的檢測(cè)蛋白含量變化的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，常用的檢測(cè)方法是用抗原包被孔板，然后用一抗和二抗檢測(cè)抗原的變化。這里使用兩種抗體的原因一方面是信號(hào)放大的需要，另一方面是要減少成本。假如每種抗體都用酶或者熒光素標(biāo)記的話，那將會(huì)需要多少種標(biāo)記的抗體呢？而且可以肯定價(jià)格一定不菲。而用標(biāo)記二抗的方法就可以大大減少需要標(biāo)記抗體的數(shù)目，同時(shí)也能提高標(biāo)記抗體的效用，這樣就能用盡量少的標(biāo)記抗體滿足盡量多的實(shí)驗(yàn)要求。

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時(shí)間：2018.12.29-2019.1.29

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人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤抑制蛋白(pRB)試劑盒，

酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）已經(jīng)成為實(shí)驗(yàn)室常用的檢測(cè)蛋白含量變化的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，常用的檢測(cè)方法是用抗原包被孔板，然后用一抗和二抗檢測(cè)抗原的變化。這里使用兩種抗體的原因一方面是信號(hào)放大的需要，另一方面是要減少成本。假如每種抗體都用酶或者熒光素標(biāo)記的話，那將會(huì)需要多少種標(biāo)記的抗體呢？而且可以肯定價(jià)格一定不菲。而用標(biāo)記二抗的方法就可以大大減少需要標(biāo)記抗體的數(shù)目，同時(shí)也能提高標(biāo)記抗體的效用，這樣就能用盡量少的標(biāo)記抗體滿足盡量多的實(shí)驗(yàn)要求。

檢測(cè)范圍：歡迎QQ或電話索取原版說(shuō)明書.
產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T。
主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
經(jīng)營(yíng)種類：進(jìn)口分裝和原裝、國(guó)產(chǎn)
性狀：盒裝液體
試劑盒保存：2-8℃低溫保存。
標(biāo)本：血清、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
ELISA常用的方法：雙抗體夾心法、間接法、競(jìng)爭(zhēng)法以及BAS-ELISA等。
預(yù)期應(yīng)用：ELISA法定量測(cè)定血清、、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。

人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤抑制蛋白(pRB)試劑盒試劑盒（多種屬）行業(yè)操作流程如下： （1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。　 （2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。 （3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。 （4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF工作液50μl?！? （5）酶標(biāo)板置37℃箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。　 （6）洗板，同（4）?！? （7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔工作液 100μl?！? （8）酶標(biāo)板置37℃箱的濕盒內(nèi)，孵育60min?！? （9）洗板，同（4）?！? （10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min?！? （11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)?！? （12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以由容器上的劃痕或指印等造成的光。 （13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定。

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編輯：小檀20181229